橄榄果提取物抗氧化活性及在皮肤健康中的作用

　　油橄榄 Oleaeuropaea L.为木犀科木犀榄属常绿乔木，是世界著名的木本油料树种，有四千多年的栽培历史。油橄榄主要分布在地中海国家，希腊、意大利、突尼斯、西班牙为集中产地。自古以来，由橄榄果制作的产品就被作为食物和传统药物使用。研究表明橄榄具有增强心脏健康[1-3]、抗癌、抗菌、抗炎等多种生物和药理活性[4]。现代生物技术分析表明，油橄榄中活性物质主要有橄榄多酚、黄酮类、裂环烯醚萜类(包括橄榄苦苷)、双黄酮等，并且其抗氧化生物活性物含量高于油橄榄果和茎[5-8]。

橄榄果提取物

　　本文对橄榄多酚类物质的抗氧化研究作一综述，表明橄榄多酚的自由基清除能力也可能对皮肤健康产生直接影响。

　　1、橄榄果中的主要化学组成及抗氧化研究综述

　　橄榄果实含油率高达30%，栽培油橄榄主要是利用果实中的油脂加工橄榄油。据生化分析，橄榄油由皂化物部分和不皂化物部分组成。皂化物部分包括游离脂肪酸和三甘油酯，三甘油酯占 98.5 % 左右;不皂化物占 1.5 %左右，包括游离醇、三萜烯、色素(叶绿素和类胡萝卜素)、生育酚、多酚、甾醇、角鳖烯及挥发性成分等。油橄榄叶中橄榄苦甙和黄酮等多酚类化合物成分复杂，国内外学者对油橄榄的化学成分做了深人的研究，已经分离得到 100 多个化合物[9-11]。油橄榄抗氧化生物活性成分主要是橄榄苦甙(oleuropein)、羟基酪 醇(hydroxytyrosol)、黄酮类(flavonoids)、木酚素类(lignan) 等，而具有羟基酪醇母体结构的小分子二酚类化合物最具有抗氧化活性作用，其中羟基酪醇和橄榄苦苷是国内外研究的热点。

　　孙瑾等[12]对提取纯化后得到的橄榄多酚类物质，通过测定其还原力、对自由基的清除能力，及对油脂过氧化的抑制作用，研究了其体外抗氧化活性，并与VC 和 BHT 进行了对比结果表明，橄榄多酚对羟基自由基、亚硝酸盐有较强的清除作用，在一定范围内，清除效果随质量浓度的升高而加强。另外，在相同浓度下，橄榄多酚对超氧阴离子自由基的清除率低于VC和BHT。另有研究对橄榄酚类提取物进行不同的抗氧化体系检测，结果表明，橄榄酚类提取物具有比 BHA(与食品抗氧化剂丁基羟基茴香醚)和 VC 更强的自由基清除能力及铁离子还原力，具有较好的体外抗氧化能力[13]。很多实验都证明橄榄多酚提取物具有较强的自由基清除能力及较高的抗氧化活性;而且在各体系中，橄榄多酚提取物的抗氧化活性与其浓度之间均有良好的量效关系[14]。

　　橄榄多酚的抗氧化性是一种综合效应，抗氧化性主要来源于多酚分子中大量的羟基酪醇[15-18]。羟基酪醇(hydroxytyrosol)，又名 3，4-二羟基苯乙醇，是一种天然抗氧化剂，广泛存在于橄榄的枝叶及果实中，特别是地中海地区的橄榄树中含量较高，是橄榄油的有效成分。大量的研究表明羟基酪醇具有很强的抗氧化作用[19-23]，羟基酪醇作为氢供体，对多种活性氧具有清除作用，可将单线态氧 1O2 还原成活性较低的三线态氧 3O2，减少氧自由基产生的可能性，同时也是各种自由基有效的清除剂，生成活性较低的多酚自由基，打断自由基氧化的链式反应[24];并可阻止多不饱和脂肪酸的自氧化，防止 DNA 受氧化损害[25]。

富恒生物橄榄多酚

　　机体不正常的代谢产生大量的氧自由基，当氧自由基的数量超过体内抗氧化防御能力，会导致细胞损伤，此时机体则处于氧化应激态。氧化应激是活性氧(ROS)的产生和细胞抗氧化能力的失衡引起的[26]，它将影响细胞大多数成分，如脂质，蛋白质和 DNA。氧化应激与疾病有显著的直接关系，其可导致亚健康甚至疾病的发生。

　　流行病学研究显示，大量摄入食物中的抗氧化剂可有效对抗氧化应激。药理学数据和临床试验证明，橄榄果提取物可有效提高抗氧化防御能力、对抗氧化应激[27-28]。如通过测量大鼠体内氧化标记物 8-异前列烷(8-异前列腺素 F2α )的排泄量，证明橄榄果提取物在大鼠体内具有显著的抗氧化效果[29]。此外，另有临床试验对 19 名健康受试者连续 4 周每天服用 400 mg 的橄榄果提取物，在研究开始前和为期四周的治疗结束后，分别测量尿样中的氧化应激标记物 8-异前列烷的尿排泄量。试验表明橄榄果提取物显著降低了氧化标记物的形成(47 %，P<0.05 平均数据)，显著改善健康受试者的氧化状态[30]。

　　2、橄榄果提取物对皮肤健康研究进展

　　皮肤的衰老与机体的衰老是同时进行的，皮肤老化是机体衰老的一部分。因为皮肤位于机体的最外层，更多地受到外源性因素的影响，因此皮肤的老化是内源性因素和外源性因素共同作用的结果[31]。皮肤外源性的老化与紫外线(UV)的照射、风吹、吸烟、饮酒、与刺激物接触有关。而 UV 的长期照射是环境中促进皮肤老化的最主要因素，故外源性老化一般是指光老化[32]。

　　光老化在临床上及组织学上均有特点。临床表现主要是：暴露部位皮肤松弛、粗深皱纹、结节、皮革样外观，色素斑增多，毛细血管扩张，原有几何图形外观明细改变或消失，肤色常呈灰黄色，可发生各种良性、癌前期或恶性肿瘤。光老化皮肤在组织学主要表现为：真皮层炎性细胞浸润，弹性纤维增粗、排列紊乱或聚集成团，真皮层上层胶原退行性变明细、最后成为无定形物质;皮肤毛细血管扩张并扭曲，最后变得极为稀疏，黑素细胞灶性增生等[32]。

　　光老化皮肤中的许多改变，如粗细皱纹、皮肤粗糙及色素沉着等可以通过药物改善和逆转，治疗和预防皮肤的光老化是可能的。在皮肤皱纹与饮食结构关系的调查中发现，日常大量食用橄榄制品的人群皮肤皱纹相对较少，进一步推测橄榄多酚的自由基清除能力也可能对皮肤健康产生直接的影响，包括预防与皱纹形成、皮肤变薄以及缺水有关的氧化效应[33-34]。并陆续有研究不断证明的此推论的正确性。

　　近年来国内外对橄榄果提取物对皮肤光老化的防治作用进行了颇有成效的研究，现综述如下。

　　2.1 促进晒后皮肤的健康

　　在一项安慰剂对照试验中，连续 4 周给 13 位男性研究对象口服橄榄果提取物，剂量为 160 mg/天。然后在其背部区域连续使用 0.054 J/cm2 到 0.135 J/cm2 剂量的紫外线(UVA+UVB 0.45 Mw/cm2 )照射。在口服橄榄果提取物前后，分别测量最低红斑剂量(MED)。结果显示橄榄果提取物使 MED 平均增加 16.45 %(P<0.01)，表明橄榄果提取物有助于促进晒后皮肤的健康[30]。

　　另外，研究通过模拟活体内的情况，如皮肤受紫外线照射后导致超氧阴离子在组织和细胞内生成，显示橄榄果提取物中多酚对活性氧如超氧阴离子 O2-具有清除能力[34-35]。生物体内氧的单电子还原，生物分子的酶促氧化和自氧化都可产生各种氧自由基。这些自由基的强反应性是导致细胞氧化损伤和衰老的主要原因。通过对橄榄中多酚类物质体外抗氧化活性研究显示橄榄多酚类物质具有良好的抗氧化性能，特别是在清除羟自由基方面，表现出了明显的优势[12]。

　　2.2 修复表皮渗透屏障，防止形成紫外线导致的光老化皱纹

　　紫外辐射可破坏皮肤表皮渗透屏障。有研究通过每天给成年无毛小鼠喂食 6.25 mg/kg~125 mg/kg 剂量的橄榄果提取物中的毛蕊花苷，持续 11 d。分别于紫外线照射后的当天、第 3 天、第 4 天测量 TEWL(经表皮失水率)，发现 TEWL 有显著性下降，这表明毛蕊花苷对表皮渗透屏障发挥了保护作用[29]。太阳光照会促进光老化，并形成皱纹。有试验将成年无毛小鼠置于紫外线 UVA 和 UVB 下进行照射，同时不断增加紫外线的剂量，并给小鼠喂食橄榄果提取物。根据皱纹等级评分表来测量每只小鼠的皱纹形成情况，结果显示服用橄榄果提取物后紫外线诱发的皱纹形成率降低的 38 %(P<0.001);同时，因为表皮厚度是评价紫外线诱发的皮肤炎症的有用参数，经测量，表皮厚度降低了 28 %[29]。

　　2.3 抑制皮肤脂质过氧化

　　皮肤干燥是富含脂质的组织发生氧化应激所致[36-37]。对于干燥的皮肤而言，脂质过氧化物是主要的非自由基中间体。对 23 名健康男性受试者进行了临床评价，他们每天分别在两颊上涂抹含有橄榄果提取物的制剂和安慰剂，一天 2 次，连续 3 个月。分别在研究开始前、第 8 周和第 12 周测量皮肤角质层的水分、皮肤弹性以及皮肤纹理。与安慰剂组相比，含有橄榄果提取物的样品对纹理分析中的粗糙度参数有显著改善。同时，角质层中的水分也呈现改善趋势[38]。

　　2.4 葡萄糖苷酶的抑制作用

　　对于皮肤健康而言，健康的血糖代谢至关重要。高血糖使人体代谢功能紊乱，病人体内葡萄糖不能利用，蛋白质、脂肪消耗增多，组织、细胞正常必需营养得不到供应，引起免疫力下降，而且高血糖也是各种细菌和真菌的良好培养基，所以容易被细菌感染，引起皮肤真菌性感染，如如体癣、指甲癣、足癣等[39]。使用不同浓度的橄榄果糖提取物测试 α-葡萄糖苷酶的活性，结果显示橄榄果提取物对这种酶有很好的抑制作用，可以通过维持健康的血糖代谢促进皮肤健康[27]。

　　3、结语

　　综上所述，橄榄果提取物的抗氧化和自由基清除能力已经显示了其在皮肤层面的有益作用，而且可以有效处理自由基介导的应激问题，如皱纹形成、表皮屏障破坏等，使其在食品添加剂、化妆品、保健食品和医药工业方面具有广阔的应用前景。但橄榄果提取物中的化学成分，尤其是橄榄多酚、羟基酪醇的抗氧化及对抗皮肤光老化作用机制错综复杂，当前的研究多限于体外生物实验和动物试验，临床研究较少，橄榄果提取物在皮肤健康方面的作用需要更多的理论、临床数据支持。

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