番石榴叶提取物降糖活性,急性毒性及颗粒制备研究

摘要：

2型糖尿病(type2 diabetes mellitus,T2DM)是指在多种致病因素作用下,导致正常的血液结构平衡被破坏,产生胰岛素抵抗等而引发的一系列代谢紊乱综合症,目前尚不能完全治愈.番石榴叶作为民间用药用来预防和治疗糖尿病已有悠久历史,近年来国内外学者也对其进行了许多关于降血糖作用的研究.本文在前人研究的基础上,以番石榴叶中具有降糖作用的2个主要成分--番石榴苷和广寄生苷为目标物,优选番石榴叶提取工艺条件,建立HPLC方法同时测定药材中的番石榴苷和广寄生苷,对番石榴叶粗提物进行体外降糖活性试验和急性毒性试验,并探索其颗粒剂成型工艺. 主要研究结果如下: (1)番石榴叶药材中番石榴苷和广寄生苷含量测定方法考察:以番石榴苷和广寄生苷对照品为对照,采用HPLC法测定番石榴叶药材中番石榴苷和广寄生苷的含量.番石榴苷在0.005～0.200 mg/mL的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,R2=0.9972,精密度RSD=1.35%,重复性RSD=1.76%,稳定性RSD=1.93%;广寄生苷在0.005～0.200 mg/mL的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,R2=0.9985,精密度RSD=1.12%,重复性RSD=1.09%,稳定性RSD=0.93%. (2)番石榴叶提取工艺:采用正交实验筛选最佳提取工艺,结果为以16倍量70%乙醇作为溶剂,提取2次,分别提取1小时和1.5小时,合并药液,浓缩后真空干燥成干粉. (3)番石榴叶提取物的降糖活性和效果评价:以大鼠附睾脂肪细胞的抗糖尿病活性检测模型,检测番石榴叶不同粗提物的降血糖效果.结果表明,番石榴叶乙醇提取物具有降血糖效果,能够促进脂肪细胞摄取葡萄糖并抑制游离脂肪酸的产生,其中优选提取工艺的效果最强,与空白组相比,细胞液中多摄取葡萄糖量为2.248±0.084mmol/L,抑制游离脂肪酸量为0.081±0.045 mmol/L. (4)番石榴叶提取物对小鼠的急性毒性试验:采用番石榴叶优选提取工艺所得干粉进行小鼠急性毒性试验,观察小鼠相关反应及指标,以期为临床安全应用番石榴叶提供一定的科学依据.给药后小鼠活动量和精神状态与给药前相比并无明显异常.小鼠在给药后观察14天未见异常,所有小鼠均健康成活.推断番石榴叶粗提物最大耐受剂量(MTD)>10 g/kg,生药材MTD>41.0 g/kg. (5)番石榴叶颗粒制备:采用湿法制粒法确定番石榴叶颗粒的成型工艺,并进行成品质量控制,颗粒产品各项指标均符合药典要求.

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